Protokolli i kompletit të indeve të kafshëve direkte PCR (pa vegla kampionimi).
Përshkrimet
Ky komplet përdor një sistem unik tampon lize për të lëshuar shpejt ADN-në gjenomike nga mostrat e indeve të kafshëve për reaksione PCR, kështu që është veçanërisht i përshtatshëm për testimin gjenetik në shkallë të gjerë.
Procesi i çlirimit të ADN-së gjenomike nga buferi i lizës përfundon brenda 10-30 minutash në 65°C.Nuk kërkohen procese të tjera si heqja e proteinave dhe ARN-së, dhe gjurmët e ADN-së të lëshuara mund të përdoren si shabllon për reaksionin PCR.
2× PCR LehtëTMPërzierja ka një tolerancë të fortë ndaj frenuesve të reaksionit PCR dhe mund të përdorë lizën e kampionit për t'u testuar si një shabllon për amplifikimin efikas dhe specifik.Ky reagent përmban Foregene D-Taq DNAPolymerase, dNTPs, MgCl2, tampon reaksioni, optimizues PCR dhe stabilizues.
D-Taq ADN polimeraza është një ADN polimerazë e zhvilluar posaçërisht nga Foregene për reaksione të drejtpërdrejta PCR.Polimeraza e ADN-së D-Taq ka tolerancë të fortë ndaj një sërë frenuesish të reaksionit PCR dhe mund të amplifikojë në mënyrë efikase sasitë e gjurmëve të ADN-së në sisteme të ndryshme komplekse të reagimit dhe shpejtësia e amplifikimit mund të arrijë 2 Kb/min, e cila është veçanërisht e përshtatshme për reaksionin e drejtpërdrejtë PCR.
Specifikimet
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
Komponentët e kompletit
Pjesa I | Tampon AL |
Foregene Proteaza | |
6× Buffer ngarkimi i ADN-së | |
Pjesa II | 2× PCR LehtëTMPërziejini |
Karakteristikat dhe avantazhet
■Nuk kërkon shumë kohë dhe pastrim të shtrenjtë të ADN-së
■ Kërkesa për mostër është e vogël, mund të testohen vetëm 5 mg inde shtazore.
■ Nuk kërkohet trajtim i veçantë si bluarja dhe grimcimi, dhe operacioni është i thjeshtë.
■ Sistemi i optimizuar PCR bën që PCR të ketë specifikë më të lartë dhe tolerancë më të fortë ndaj frenuesve të reaksionit PCR.
Parametrat e kompletit
Aplikimi: një shumëllojshmëri e indeve shtazore.
ADN e lëshuar nga liza e mostrës: përdoret vetëm si shabllon PCR.
Kompleti mund të përdoret për qëllimet e mëposhtme: identifikimin e transgjenozës, gjenotipizimin e kafshëve, etj.
Rrjedha e punës
Ruajtja dhe afati i ruajtjes
Pjesa I e këtij kompleti duhet të ruhet në 2-8℃.
Reagenti Buffer AL mund të ruhet për 12 muaj në kushte të thata;mund të ruhet në 2-8℃për ruajtje më të gjatë.
Reagent Foregene Protease ka një formulë unike.Për të siguruar aktivitetin dhe stabilitetin e tij, ju lutemi ruajeni në 4℃për 12 muaj.
Reagjenti 6×Buferi i ngarkimit të ADN-së mund të ruhet në 4℃ose -20℃për një kohë të gjatë.
Pjesa II e këtij kompleti duhet të ruhet në -20℃.
Reagenti 2×PCR LehtëTMPërzierja mund të ruhet për 12 muaj në -20℃;nëse përdoret shpesh, mund të ruhet edhe në 4℃për ruajtje afatshkurtër (përdoret brenda 10 ditëve).