Lindja e PCR
PCR (Reaksioni zinxhir i polimerazës)
Kanë kaluar më shumë se 30 vjet që nga shpikja e reaksionit zinxhir të polimerazës.Për më shumë se 30 vjet, pasi studiues të shumtë në mbarë botën vazhdojnë të plotësojnë dhe përmirësojnë, teknologjia PCR është bërë metoda më e përdorur gjerësisht dhe më e shpeshtë dhe më e rëndësishme e kërkimit bazë në të gjithë fushën e Shkencave të Jetës.
TouchDown PCR, PCR në kohë reale, Multi PCR, etj., të zhvilluara në bazë të aplikimit të gjerë të teknologjisë tradicionale PCR, si dhe PCR dixhitale e sapo shfaqur (Dixhitale PCR), kanë pasuruar së tepërmi metodat e kërkimit të shumicës së studiuesve shkencorë dhe kanë përshpejtuar shumë procesin e zhvillimit të shkencave moderne të jetës, veçanërisht biologjisë molekulare, që ka dhënë një kontribut të madh në jetën e njeriut dhe biologjisë molekulare.
Defektet e teknologjisë tradicionale PCR
Ndarja komplekse e acidit nukleik dhenxjerrja:
★ Teknologjia tradicionale PCR: kërkohet
★ Teknologjia që rrjedh nga PCR: kërkohet
★ Mostrat e ADN-së dhe ARN-së: dallime të mëdha, kërkesa të vështira operimi
★ Rreziqet e trupit: reagentët toksikë dëmtojnë trupin
Teknologjia tradicionale PCR dhe teknologjia e derivateve kanë një parakusht - ndarjen dhe pastrimin e acidit nukleik
Çdo mostër biologjike duhet të kalojë nëpër një seri përpunimi të komplikuar dhe të lodhshëm të mostrës për të marrë mostra të acidit nukleik që plotësojnë kërkesat e teknologjisë PCR.
Ndarja dhe nxjerrja e ADN-së dhe ARN-së ka qenë gjithmonë një detyrë themelore që studiuesit përkatës shkencorë duhet ta përsërisin çdo ditë.
Për shkak të dallimeve të mëdha midis mostrave, proceset e ndarjes dhe nxjerrjes së ADN-së dhe ARN-së janë gjithashtu shumë të ndryshme.Kjo punë kërkon një nivel të lartë aftësie teknike për operatorët.Teknikat tradicionale të ndarjes dhe nxjerrjes kërkojnë kontakt afatgjatë me disa reagentë kimikë shumë toksikë.Do të shkaktojë dëme të pakthyeshme në trupin e operatorit, madje do të shkaktojë dëme të drejtpërdrejta gjatë eksperimentit.
Në të njëjtën kohë, për ata që kanë një numër të madh mostrash për të studiuar, ndarja dhe nxjerrja e acideve nukleike është një detyrë intensive e punës.
Kompletet e izolimit dhe nxjerrjes së acidit nukleik në treg tani janë të pjekura dhe ka shumë marka, por ato janë afërsisht të njëjta.Qoftë nëse është një komplet centrifugal i kolonës me membranë xhel silicë ose një çantë e metodës së rruazave magnetike, kërkon shumë kohë dhe është e kushtueshme.Përveç kostos së kompletit, ka edhe kërkesa të veçanta për pajisjet laboratorike.Stacioni i automatizuar i punës i përdorur në metodën e rruazave magnetike është një pajisje tipike me vlerë të lartë në shkallë të gjerë, e cila është një shpenzim i madh për laboratorin.
Në përmbledhje
Para kryerjes së eksperimenteve PCR, trajtimi paraprak i mostrave është një dhimbje koke e pashmangshme për studiuesit.Si të zgjidhet ky problem dhe nëse eksperimentet PCR mund të kryhen pa ndarjen dhe nxjerrjen e acideve nukleike ka qenë gjithmonë mendimi i shumicës së studiuesve shkencorë dhe personelit të laboratorit klinik.
Zgjidhja e Foregene
Pas vitesh kërkimesh të mundimshme mbi teknologjinë e drejtpërdrejtë të PCR dhe kompleteve të lidhura me to, Forgene depërtoi me sukses nëpër shumë pengesa dhe arriti me sukses PCR direkte për shumë lloje të mostrave të ndryshme me rezistencë dhe përshtatshmëri të fortë, duke i lejuar studiuesit të heqin qafe ndarjen dhe nxjerrjen e rëndë dhe të rrezikshme të acideve nukleike.Kjo do të reduktojë shumë intensitetin e punës së secilit, do të përshpejtojë procesin e eksperimentit dhe do të kursejë kostot e kërkimit shkencor dhe testimit.
Kuptimi dhe njohuritë e Forgene për DirectPCR
Së pari, teknologjia DirectPCR është një teknologji e drejtpërdrejtë PCR për inde të ndryshme të mostrave biologjike.Në këtë gjendje teknike, nuk ka nevojë të ndahen dhe ekstraktohen acidet nukleike, dhe mostra e indeve përdoret drejtpërdrejt si objekt, dhe primerët e gjenit të synuar shtohen për reaksionin PCR.
Së dyti, teknologjia DirectPCR nuk është vetëm një teknologji tradicionale e amplifikimit të shabllonit të ADN-së, por gjithashtu përfshin PCR të transkriptimit të kundërt të shabllonit të ARN-së.
Së treti, teknologjia DirectPCR jo vetëm që kryen drejtpërdrejt reaksionet rutinë cilësore të PCR në mostrat e indeve, por përfshin gjithashtu reaksione qPCR në kohë reale, gjë që kërkon që sistemi i reagimit të ketë një aftësi të fortë për t'i rezistuar ndërhyrjes së fluoreshencës në sfond dhe për të antagonizuar shuarësit endogjenë të fluoreshencës.
Së katërti, mostrat e indeve të synuara nga teknologjia DirectPCR kërkojnë vetëm lëshimin e shablloneve të acidit nukleik dhe nuk heqin proteinat, polisaharidet, jonet e kripës, etj. që ndërhyjnë në reaksionin PCR.Kjo kërkon që polimeraza e acidit nukleik dhe PCR Mix në sistemin e reagimit të kenë anti-rikthyeshmëri dhe përshtatshmëri të shkëlqyer, dhe mund të sigurojë aktivitetin e enzimës dhe saktësinë e replikimit në kushte komplekse.
Së pesti, mostrat e indeve të synuara nga teknologjia DirectPCR nuk i janë nënshtruar asnjë trajtimi të pasurimit të acidit nukleik dhe sasia e shabllonit është shumë e vogël, gjë që kërkon ndjeshmëri jashtëzakonisht të lartë dhe efikasitet amplifikimi të sistemit të reagimit.
konkluzioni
Teknologjia DirectPCR është një nga zhvillimet dhe risitë më të rëndësishme teknologjike në 30 vitet e fundit që nga lindja e teknologjisë PCR.Forgene ka dhe do të vazhdojë të jetë një pionier dhe novator i kësaj teknologjie.
Perspektiva e aplikimit të teknologjisë DirectPCR është shumë e gjerë.Përmirësimi dhe promovimi i vazhdueshëm i kësaj teknologjie me siguri do të sjellë ndryshime subversive në punën kërkimore-shkencore dhe inspektuese.Ky është një revolucion i teknologjisë PCR.
Koha e postimit: Shkurt-21-2017
