1: Zëvendësoni furnizimet eksperimentale në kohë

Vendosni kontrollin negativ (NTC) dhe përsërisni atë shumë herë.Pasi të konstatohet se ka ndotje të produktit PCR në laborator, zëvendësoni me kohë të gjitha furnizimet eksperimentale.Të tilla si: rihollimi dhe përgatitja e primerëve, risterilizimi i majës së pipetës, tubit EP, ddH2O, etj., zëvendësimi me një pipetë të re dhe huazimi i përkohshëm i laboratorëve të tjerë për të kryer eksperimente PCR.Laboratori i kontaminuar duhet të ajroset dhe të rrezatohet me rreze ultravjollcë derisa ndotja e produktit PCR të eliminohet përpara se të vazhdohet me eksperimentin.

2: Zgjatni kohën e ekspozimit ndaj UV

Vlen të përmendet se për të hequr kontaminimin e ADN-së, rrezatimi i rregullt ultravjollcë duhet të zgjatet me 2 orë se zakonisht.Megjithatë, efekti i rrezatimit UV në heqjen e fragmenteve të vogla (nën 200 bp) të kontaminimit të ADN-së nuk është ende i mirë.

Gjatësia e valës ultraviolet (nm) është përgjithësisht 254/300 nm dhe mjafton të rrezatohet për 30 minuta.Duhet të theksohet se kur zgjidhni UV për të eliminuar ndotjen e produkteve të mbetura PCR, duhet të merret parasysh gjatësia e produktit PCR dhe shpërndarja e bazave në sekuencën e produktit.Rrezatimi UV është efektiv vetëm për fragmente të gjata mbi 500 bp dhe ka pak efekt në fragmente të shkurtra.

Gjatë rrezatimit UV, bazat pirimidine në produktin PCR do të formojnë dimerë.Këta dimerë mund të përfundojnë shtrirjen, por jo të gjitha pirimidinat në zinxhirin e ADN-së mund të formojnë dimerë, dhe rrezatimi UV gjithashtu mund të thyejë dimerët..Shkalla e formimit të dimerit varet nga gjatësia e valës UV, lloji i dimerit pirimidin dhe sekuenca e nukleotideve ngjitur me zonën e dimerit.Prandaj, nëse fragmentet e përforcuara me PCR janë të vogla, rekomandohet përdorimi i sistemit të ndotjes së produktit anti-PCR UNG.

3: Pastrues të zakonshëm të ndotjes së ADN-së

Aerosolet krijohen lehtësisht kur shtohen pipeta, gjë që është e vështirë të shmanget dhe do të qetësohet shpejt.Prandaj, është padyshim një zgjedhje e mirë që të përdoren shpesh pastruesit e veçantë të ndotjes së ADN-së për të parandaluar përhapjen e ndotjes së ADN-së.

4:Përdorni sistemin kundër ndotjes UNG

Pasi të hiqet kontaminimi i produktit PCR, laboratori i testimit mund të përdorë sistemin e ndotjes së produktit anti-PCR UNG për të parandaluar kontaminimin e produktit PCR.Në laboratorët e përgjithshëm, ju mund të kryeni ndarje të thjeshta eksperimentale, të ndani rreptësisht zonën e produktit PCR nga zonat e tjera, të vendosni disa rregulla dhe rregullore laboratorike dhe të kryeni trajnime përkatëse për të parandaluar shfaqjen e kontaminimit të produktit PCR.

Rekomandime: Krijimi i një laboratori të arsyeshëm PCR, mbajtja e një mjedisi të mirë PCR, formulimi i procedurave standarde të funksionimit të PCR dhe kultivimi i vetëdijes rigoroze të funksionimit të eksperimentuesve janë çelësi për parandalimin ose reduktimin e ndotjes së eksperimenteve PCR.