Testimi laboratorik fillon me mbledhjen e mostrave dhe mbledhja e mostrës është më e lehtë për t'u anashkaluar.Gjëja më e rëndësishme për mbledhjen e kampionit është zgjedhja e llojit të duhur të mostrës, përdorimi i mjeteve të përshtatshme të marrjes së mostrave dhe kryerja e transportit dhe përpunimit të arsyeshëm.

I.Lloji i mostrës

Llojet e zakonshme të mostrave janë si më poshtë:

Metoda e kampionimit mund t'i referohet specifikimeve teknike për monitorimin mjedisor të koronavirusit të ri në tregun e tregtisë bujqësore (pazari)”:

1. Mostrat e shtupës nga tamponët e fytit, duart, rrobat dhe objektet e tjera të praktikantëve: kërkohet përdorimi i solucionit të ruajtjes së virusit në tubin e kampionimit të virusit dhe infiltrimi i plotë i shtupës së pambukut të marrjes së mostrave.Sipërfaqja e tokës) aplikohet në mënyrë të përsëritur dhe shpëlahet për më shumë se 3 herë.Në të njëjtën kohë, është e nevojshme të kryhet kampionimi i shpërndarë me shumë pika në sipërfaqen e objektit të mostrës.

2. Mostrat e shtupës sipërfaqësore të ushqimit: Mostrat e ushqimit nuk mund të mblidhen drejtpërdrejt.Ushqimi që do të mblidhet duhet të ndahet me kujdes dhe të ruhet në një qese të pastër kampionimi përpara se të mblidhen mostrat e shtupës.Kërkohet përdorimi i solucionit të ruajtjes së virusit në tubin e marrjes së mostrave të virusit, pas njomjes së plotë të shtupës së pambukut të kampionimit, për të lyer dhe shpëlarë në mënyrë të përsëritur sipërfaqen e mostrës së ushqimit që do të mblidhet më shumë se 3 herë.Në të njëjtën kohë, është e nevojshme të kryhet kampionimi i shpërndarë me shumë pika në sipërfaqen e mostrës.

3. Mostrat e ujërave të zeza: Sipas shpërndarjes së sistemit të kullimit në treg, zgjidhni 2-3 vende për marrjen e mostrave të ujërave të zeza, duke u fokusuar në grumbullimin e rrjetit të brendshëm të tubacioneve, në rrjedhën e poshtme të drejtimit të rrjedhës së ujit ose lidhjen me rrjetin e tubacioneve bashkiake.Për të mbledhur një kampion tamponi, zhyteni atë në ujërat e zeza me një shtupë pambuku për marrjen e mostrave për ta bërë atë të thithë ujërat e zeza dhe ta shpëlani në tubin e marrjes së mostrave më shumë se 3 herë.Për të mbledhur mostra të ujërave të zeza, përdorni shishe plastike polietileni për të mbledhur mostra 30-500 mL të ujërave të zeza;për grumbullimin e ujërave të zeza me një vëllim më të madh se 500 mL, mund të përdoren kova plastike polietileni ose pajisje speciale pasurimi të mostrave të ujit në vend.Në të njëjtën kohë, është e nevojshme të kryhet kampionimi i shpërndarë me shumë pika për vendndodhjen e marrjes së mostrave të ujërave të zeza.

4. Mostrat e kafshëve: Për kafshët e gjalla, tamponët e marrjes së mostrave mund të përdoren për të mbledhur tamponët e sipërfaqes së trupit, tamponët orofaringeale dhe tamponët analë, dhe mostrat e jashtëqitjes ose sekretimit gjithashtu mund të mblidhen dhe regjistrohen në përputhje me rrethanat në fletën e regjistrimit.Për mostrat e kafshëve që i janë nënshtruar heqjes së lëkurës, etj., përdorni shtupë pambuku për të mbledhur mostrat e sipërfaqes së tyre të trupit dhe të zgavrës së trupit.Kërkohet të përdoret solucioni i ruajtjes së virusit në tubin e marrjes së mostrave të virusit për të infiltruar plotësisht shtupë pambuku të marrjes së mostrave dhe më pas të përsëritet aplikimi i sipërfaqes së mostrës së ushqimit që do të mblidhet.Shabu më shumë se 3 herë.Në të njëjtën kohë, është e nevojshme të kryhet kampionimi i shpërndarë me shumë pika në sipërfaqen e mostrës.

5. Pajisje të tjera: kontejnerë për transportin dhe mbarështimin e kafshëve si kafaze apo rezervuarë peshku.Së pari, vëzhgoni ose kuptoni llojet specifike të kafshëve të ruajtura dhe të edukuara në kontejner dhe mblidhni mostrat e shtupës në murin e brendshëm të kontejnerit ose mostrat e lëngshme të përmbajtjes.

6. Mblidhni mostra aerosol në zonat ku mblidhen njerëzit, zona tregtare lokale të ajrosura dobët, zyra dhe dhoma pushimi.

II.Mjetet e kampionimit
1. Tuba e grumbullimit të gjakut
Nëse duhet të bëni më vonë testimin e acidit nukleik dhe mostrat e antikoagulantëve, rekomandohet të përdorni një enë gjaku me vakum që përmban antikoagulant EDTA për të mbledhur gjak;për mostrat e serumit, rekomandohet përdorimi i një ene gjaku me vakum pa antikoagulant.

2. Tampon për marrjen e mostrave

Rekomandohet përdorimi i tamponëve të polipropilenit në vend të tamponëve me alginat kalciumi ose tamponëve me shtylla druri, sepse ato mund të përmbajnë substanca që çaktivizojnë disa viruse dhe pengojnë testimin PCR.Tamponët me koka pambuku nuk mund të përdoren, sepse fijet e pambukut kanë një absorbim të fortë të proteinave dhe nuk shpërndahen lehtësisht në tretësirën e mëvonshme të konservimit.

Në “Specifikimet teknike për mbledhjen dhe zbulimin e përzier 10-në-1 të acideve nukleike të reja të koronavirusit”, përcaktohet qartë se “tampoja e marrjes së mostrave duhet të jetë prej poliestër, najloni dhe materiale të tjera jo-pambuku dhe jo-alginate kalciumi, dhe doreza duhet të jetë prej materiali jo druri.Pika e thyerjes është rreth 3 cm nga maja e kokës së shtupës, e cila është e lehtë për t'u thyer.”

CDC në Shtetet e Bashkuara përmendi gjithashtu “Përdorni vetëm shtupë me fibra sintetike me boshte plastike ose teli.Mos përdorni tampona alginate kalciumi ose shtupa me boshte druri,pasi mund të përmbajnë substanca që inaktivizojnë disa viruse dhe pengojnë testimin PCR.

Aktualisht përdoret gjerësisht një shtupë sterile njëpërdorimshme e grumbulluar nga najloni e kombinuar me një shufër plastike.Tampoja e grumbulluar ka thithjen më të mirë të ujit dhe shpejtësinë e lëshimit.Sipas vendeve të ndryshme të marrjes së mostrave, koka e shtupës ka gjithashtu madhësi dhe fibra të ndryshme.Trashësia.”

3. Zgjidhja e ruajtjes së transportit të mostrës

Zgjidhja e ruajtjes së inaktivizimit të virusit: një sasi e përshtatshme e përqendrimit të kripës së guanidinës dhe një sërë përbërësish të lizës së virusit mund të lizojnë drejtpërdrejt virusin për të çliruar acidin nukleik, të çaktivizojnë RNazën dhe DNazën dhe të sigurojnë integritetin e acidit nukleik, i cili mund të përdoret për zbulimin e mëvonshëm qPCR.Nuk mund të përdoret për kultivimin dhe izolimin e virusit.

Tretësira e transportit dhe ruajtjes së virusit: përmban kripëra, aminoacide, vitamina, glukozë dhe proteina të nevojshme për mbijetesën e virusit, të cilat mund të ruajnë aktivitetin e virusit.Mund të përdoret për nxjerrjen e acidit nukleik dhe zbulimin e virusit në të ardhmen, dhe gjithashtu mund të përdoret për kultivimin dhe ndarjen e virusit.

4. Tubi i ruajtjes së mostrës dhe qesja e mostrës

Tubi i ruajtjes së kampionit duhet të jetë një tub plastik steril me një kapak vidë që nuk absorbon acidin nukleik.Çdo tub mostër duhet të mbulohet me një qese mostre për të parandaluar rrjedhjen dhe kontaminimin e kampionit.

III.Substancat ndërhyrëse në mostër

Substancat ndërhyrëse në eksperimentet PCR

1. interferent endogjen

Substancat e pranishme në mostrën e trupit mund të ndërhyjnë në zbulimin e substancave të tjera.

Gjaku:hem (>1mg/ml), heminë (>0.1ng/μl), trigliceride, IgG etj.;

Urina:Ure (20 mM);

Jashtëqitje:polisaharide bimore, kolate;

Indi:proteazë, kolagjen;

Qumështi: proteazë, jon kalciumi;

Droga: antibiotikë, barna antivirale, hormone etj.

tjera.

2. interferent ekzogjen

Ai vjen nga substanca që mund të ndërhyjnë në zbulimin e substancave të tjera in vitro.Aditivët e mostrave dhe substancat që mund të kontaktohen gjatë mbledhjes dhe përpunimit të mostrës:

Furnizimet e testit: xhel për ndarjen e serumit, enë për grumbullimin e mostrave dhe tapë gome, kateter, lëng për shpëlarjen e kateterit, pluhur dorezash, etj.

Antikoagulant: heparin (>0.1 U/mL), EDTA (>0.5 mM), etj.;

Tretës organikë: izopropanol (>0.1 IU/ml), betainë, dimetil sulfoksid, formamid, glicerinë, PEG etj.;

Dezinfektues: alkoolet (etanol>1%), aldehidet, fenolet (fenol>0.2%), peroksidet, acidet e forta (HCL), alkalet e forta (NaOH) etj.;

Detergjent:SDS (>0.005%);

Dheu: Humus

Lëndë ngjyruese: Lejla

tjera.

Në kushtet aktuale të marrjes së mostrave në natyrë, siç është mbledhja e mostrave mjedisore, mostrat mund të përmbajnë një sërë substancash ndërhyrëse dhe përbërja e substancave ndërhyrëse në çdo vend është e ndryshme, gjë që kërkon që eksperimentet e ndërhyrjes PCR të kryhen sipas kushteve lokale.

IV.Kushtet e ruajtjes dhe transportit të mostrave

Mostrat klinike të sapo mbledhura duhet të dërgohen në laborator brenda 2 deri në 4 orë pas grumbullimit në 2°C deri në 8°C.Ruani në 4℃ brenda 24 orëve.Mostrat e përdorura për izolimin e virusit dhe zbulimin e acidit nukleik duhet të testohen sa më shpejt të jetë e mundur.Mostrat që mund të testohen brenda 24 orëve mund të ruhen në 4°C;mostrat që nuk mund të zbulohen brenda 24 orëve duhet të ruhen në -70°C ose më poshtë (nëse jo- Ruani në 70°C në frigorifer në -20°C).

Përmbledhje:Mbledhja e standardizuar, transportimi dhe ruajtja e mostrave janë thelbësore për testimin e mëvonshëm.Negativët e rremë të shumë testeve laboratorike shkaktohen nga grumbullimi, transportimi dhe ruajtja jo e duhur e mostrave që çojnë në degradimin e acidit nukleik viral.Megjithatë, shumë laboratorë ende injorojnë rëndësinë e marrjes së mostrave.Shpresoj se ky artikull mund të zgjojë vëmendjen e të gjithëve ndaj kampionimit dhe të bëjë kampionime më shkencore dhe të arsyeshme!

Produkt i ngjashëm:

Kompleti i Zbulimit të Acideve Nukleike Variante SARS-CoV-2 (I) (Multiplex PCR Probe Fluorescent Method)-Për zbulimin e mutantëve nga Brazili, Afrika e Jugut dhe MB