Metodat PCR dhe ndotja me aerosol me acid nukleik në laboratorët e testimit të acidit nukleik janë si dy anët e një monedhe.Ne mund të zgjedhim vetëm ta kemi apo jo, por nuk mund të zgjedhim nëse duam apo shpenzojmë.

1. Ekzaminimi i mbartësit të ADN-së

Për të arritur heqjen hapësinore të kontaminimit të aerosolit me acid nukleik, fillimisht është e nevojshme të ekzaminohen heqësit e ADN-së që mund të heqin acidet nukleike në gjendje të lëngshme.Sepse nuk ka shumë heqës të ADN-së që vërtet funksionojnë.Për metodën eksperimentale, ju lutemi referojuni: Heqësi i ADN-së nuk mund të jetë një "qoshe e fshehtë" e laboratorit!

Në këtë eksperiment, 100 kopje/μL (CT përafërsisht 31) të plazmidit ASFV dhe mbartësit të ADN-së të përcaktuara në sasi me PCR dixhitale u përzien në vëllime të barabarta, dhe më pas reaguan në temperaturën e dhomës për përkatësisht 10 minuta, 20 minuta dhe 30 minuta.Pas nxjerrjes së acidit nukleik, u krye amplifikimi qPCR.Një kontroll pozitiv i përzier me plazmid dhe ujë u krahasua.Meqenëse eksperimenti nuk u krye në të njëjtën kohë, mund të ketë një devijim të caktuar midis rezultateve, por kjo nuk ndikon në përfundimin e eksperimentit.Deri më tani, kam vlerësuar 10 produkte komerciale për heqjen e ADN-së.Vetëm produktet Nr. 1, Nr. 6 dhe Nr. 8 mund të degradojnë efektivisht ADN-në plazmide në gjendje të lëngshme.Produktet e tjera nuk kanë pothuajse asnjë efekt.

Tabela 1 Efekti i heqjes së acidit nukleik të mbartësit të ADN-së në treg

2. Eksperimenti i efektit të heqjes së ADN-së i dezinfektuesve të përdorur zakonisht

1. Ekzaminimi i dezinfektantëve të përdorur zakonisht

Ka shumë lloje dezinfektantësh që përdoren zakonisht në laboratorë: aldehidet, fenolet, alkoolet, kripërat e amonit kuaternar, peroksidet, preparatet e klorit dhe acidet dhe bazat.Efektet dezinfektuese të këtyre dezinfektuesve në mikroorganizma janë verifikuar plotësisht nga eksperimentet, por nuk ka të dhëna të mjaftueshme eksperimentale për efektin e degradimit të acideve nukleike.Laboratorët e testimit të acidit nukleik kanë nevojë për një dezinfektues që jo vetëm që ka një efekt të mirë dezinfektues ndaj mikroorganizmave, por gjithashtu mund të degradojë ADN-në.Rezultatet e testit tregojnë se vetëm dy preparate klori me 84 dezinfektues dhe acid trikloroizocianurik dhe acid klorhidrik 1 M plotësojnë kërkesat.Meqenëse acidi klorhidrik 1 M është shumë gërryes, rekomandohet që preparatet e klorit të përdoren si depozitim të mbeturinave në laboratorët e testimit të acidit nukleik.Megjithatë, preparatet e klorit janë gërryese ndaj metaleve dhe nuk mund të përdoren për dezinfektimin e instrumenteve dhe pajisjeve.

Tabela 2 Efektet e heqjes së ADN-së të llojeve të ndryshme të dezinfektantëve

2. Përqendrimi minimal efektiv i preparateve të klorit

Dezinfektuesit me bazë klori kanë një efekt të fortë degradimi të ADN-së, por për shkak të gërryerjes dhe acarimit të tyre metalik, ato mund të përdoren për të pastruar dyshemenë, tavanet jo metalike, majat e njomjes, tubat e centrifugës dhe sende të tjera testuese.

Sipas "Udhëzimeve Teknike të Dezinfektimit të Epidemisë së Pneumonisë Koronare të Re": Ndotës (gjaku i pacientëve, sekrecionet dhe të vjellat) klori i disponueshëm 5g/L-10g/L dezinfektues me përmbajtje klor;dyshemetë, muret dhe sipërfaqet e objekteve përdorin klor të disponueshëm 1g/L Dezinfektues klori: rrobat, shtrojat dhe tekstilet e tjera fillimisht zhyten në dezinfektues me klor me 0,5 g/L klor të disponueshëm për 30 minuta dhe më pas pastrohen si zakonisht.

Tabela 3 Efekti i heqjes së ADN-së të përqendrimeve të ndryshme të dezinfektuesit të klorit

Rezultatet e testit tregojnë se: kur përqendrimi efektiv i klorit është më i madh ose i barabartë me 1,2 g/L, dezinfektuesi që përmban klor mund të degradojë plotësisht 100 kopje/μL plazmid kur përdoret për 5 minuta.Kur vepron për 10 minuta, 84 dezinfektues me një përqendrim efektiv klori më të madh ose të barabartë me 0,6 g/L mund të degradojë plotësisht 100 kopje/μL të plazmideve.

3. Eksperiment për heqjen e ajrit të ndotur nga aerosoli i acidit nukleik

Si të pastrohet ajri i ndotur nga aerosolet e acidit nukleik?Shumica e mendimeve janë për të krijuar një mjedis të kontaminuar me aerosol dhe për ta pastruar atë, ose për të pastruar acidet nukleike pas kontaminimit.Për mua, një eksperiment që nuk mund të përsëritet dhe rezultatet e eksperimentit nuk mund të analizohen në mënyrë sasiore është i pakuptimtë, kështu që huazova disa metoda të dezinfektimit të ajrit dezinfektues.Shih "GB27948-2020 Kërkesat e Përgjithshme për Dezinfektuesit e Ajrit" dhe "Specifikimet Teknike të Dezinfektimit"

1. Materialet e testimit

1.1 Heqësi i ADN-së: Në këtë eksperiment, u zgjodhën dy heqës të ADN-së të disponueshëm në treg 6 dhe 8 në Tabelën 1.

1.2 Plazmidi testues: Duke marrë parasysh që vlera e CT e shumicës së ndotjes laboratorike do të jetë më e lartë se 30, përqendrimi i plazmidit të gjenit ASFV i përdorur këtë herë është rreth 100 kopje/μL, dhe CT sasiore fluoreshente PCR është rreth 31.07.Shtoni plazmidin në shtupë pambuku të grumbulluar dhe thajeni në ajër.

1.3 Instrumenti i testimit: Instrumenti i dezinfektimit Bilingkehan KVBOX, i cili mbështetet me dashamirësi nga Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd., ka performancë të shkëlqyer dezinfektimi të ajrit me dezinfektues peroksid hidrogjeni dhe mund të vrasë në mënyrë efektive sporet dhe mikroorganizmat e tjerë.

1.4 Hapësira e provës: një dritare e mbyllur transferimi prej rreth 0.1 metër kub.

2. Metoda e testimit

Sasia e grupit të dezinfektuesit në makinën e dezinfektimit është 10 ml, dhe përqendrimi është 100 ml/m3, që është shumë më i lartë se "GB27948-2020 Kërkesat e Përgjithshme për Dezinfektuesit e Ajrit": kur përdorni dezinfektim me spërkatje aerosol, sasia e dezinfektuesit duhet të jetë ≤10 ml/m3.