Lnc-RT Heroᵀᴹ I (Me gDNase) (Super Premix për sintezën e cDNA të vargut të parë nga lncARN)
Specifikimet
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (Me gDNase) është një sistem transkriptimi i kundërt i zhvilluar posaçërisht për lncARN për të hequr shpejt kontaminimin gjenomik të ADN-së.5×gDNase Mix mund të heqë shpejt gjenomin e mbetur në ARN në 42°C për 2 minuta, duke shmangur në mënyrë efektive ndërhyrjen e gjenomit në rezultatet e qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix përmban Foregene LncRNA Reverse Transcriptase e zhvilluar posaçërisht nga Foregene, e cila është një lloj i ri i transkriptazës së kundërt posaçërisht për lncRNA dhe shabllone të tjera komplekse të ARN-së, me afinitet më të fortë të ARN-së dhe efikasitet më të lartë të regjistrimit të kthimit.Sistemi i optimizuar e bën shpejtësinë e transkriptimit të kundërt më të shpejtë dhe mund të transkriptojë lehtësisht shabllonet e ARN-së me përmbajtje të lartë GC dhe strukturë komplekse dytësore.Sinteza e cDNA e vargut të parë mund të përfundojë në 42°C në 15 minuta.
Komponentët e kompletit
| 5× Përzierje gDNase |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| ddH2O pa RNase |
| Udhëzimet |
Karakteristikat dhe avantazhet
■Aftësi efikase për të hequr gDNA, e cila mund të heqë gDNA në shabllon brenda 2 minutash.
■ Mund të ndryshojë në mënyrë efikase transkriptimin e lncARN.Kur produkti i transkriptimit të kundërt i nënshtrohet qPCR, vlera e Ct është më e ulët se ajo e sistemit konvencional të transkriptimit të kundërt.
■ Sistemi efikas i transkriptimit të kundërt, duhen vetëm 15 minuta për të përfunduar sintezën e cDNA-së së vargut të parë.
■ Modelet komplekse: shabllonet me përmbajtje të lartë GC dhe strukturë komplekse dytësore mund të ndryshohen gjithashtu me efikasitet të lartë.
■ Sistemi i transkriptimit të kundërt me ndjeshmëri të lartë, shabllonet e nivelit pg mund të marrin gjithashtu cDNA me cilësi të lartë.
■ Sistemi i transkriptimit të kundërt ka stabilitet të lartë termik, temperatura optimale e reagimit është 42℃, dhe ende ka performancë të mirë të transkriptimit të kundërt në 50℃.
Aplikimi i kompletit
Analiza sasiore relative e lncARN-së.
Analiza sasiore absolute e lncARN.
Ai mund të analizojë shpejt dhe me saktësi gjurmët e ARN-së, siç është virusi ARN.
Transkriptimi i kundërt i shablloneve të ARN-së me përmbajtje të lartë GC ose strukturë komplekse dytësore.
Rrjedha e punës
Ruajtja dhe afati i ruajtjes
Kompleti duhet të ruhet në -20°C. Ruajeni produktin në një frigorifer me temperaturë konstante në -20°C menjëherë pas marrjes.Nëse kushtet e ruajtjes janë të përshtatshme, produkti nuk do të degradojë asnjë performancë gjatë periudhës së vlefshmërisë 1-vjeçare.
Udhëzues për analizën e problemit
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-amplifikimi specifik
1. Dizajn i paarsyeshëm i abetares
Rekomandim: Dizenjoni primerët sipas parimeve të projektimit të primerit.
2. Mbetjet e gjenomit.
Sugjerim: Sigurohuni që hapi i parë i temperaturës së reaksionit të heqjes së gADN-së të jetë 42°C dhe koha e reagimit mund të zgjatet gjithashtu në 5 minuta.
Nuk ka sinjal përforcues nga RT-qPCR
1. ARN degradohet.
Rekomandim: Materiali për nxjerrjen e ARN duhet të jetë sa më i freskët dhe të përdoret ARN me cilësi dhe pastërti të lartë.
2. ARN përmban inhibitorë.
Rekomandim: Frenuesit e transkriptimit të kundërt përfshijnë përgjithësisht SDS, kripërat e guanidinës, EDTA, etj. Rekomandohet larja e precipitatit të ARN-së me 70% etanol për të hequr frenuesit.
3. Çështjet e projektimit të abetares.
Rekomandim: Sipas parimit të projektimit të primerit, ridizajnoni abetaret për inspektim.
Brezi i synuar shfaqet në kontrollin bosh
1. Ndotja e veglave të funksionimit ose reagentëve.
Rekomandim: Të gjithë reagentët ose pajisjet për eksperiment duhet të autoklavohen.Jini të kujdesshëm dhe të butë kur përdorni për të parandaluar thithjen e mostrave të ADN-së në pipetë ose derdhjen nga tubi i centrifugës.
2. Kontaminimi ka ndodhur gjatë përgatitjes së sistemit të reagimit PCR.
Rekomandim: Merrni masat e nevojshme gjatë trajtimit, si p.sh.: veshja e dorezave latex, përdorimi i majave të filtrit.Përdorni PCR Mix në kohë reale në një sistem rezistent ndaj kontaminimit.
3. Abetaret janë të degraduara.
Sugjerim: Përdorni elektroforezën SDS-PAGE për të zbuluar nëse primerët janë të degraduar dhe zëvendësoni me primerë të rinj për eksperimentet e zbulimit të fluoreshencës.
Manuali i udhëzimeve:
