Protokolli i indeve të kafshëve të drejtpërdrejta të PCR-së-UNG (pa vegla për marrjen e mostrave)
Përshkrimi i kompletit:
Përdorni direkt lizatin e indeve shtazore si shabllon për amplifikimin PCR, pa ekstraktim të veçantë të ADN-së, me ndjeshmëri të shpejtë dhe të lartë.U shtua sistemi kundër ndotjes UNG për të eliminuar pozitivët e rremë.
◮Nuk kërkohet pastrim i ADN-së që kërkon kohë dhe i kushtueshëm.
◮Kërkesa e mostrës është e vogël, thjesht merrni një farë të vetme.
◮Nuk kërkohen trajtime të veçanta si bluarja dhe dërrmimi, dhe operacioni është i thjeshtë.
◮Sistemi i optimizuar PCR mundëson që PCR të ketë specifikë më të lartë dhe tolerancë më të fortë ndaj frenuesve të reaksionit PCR.
Përshkrimet
Ky komplet përdor një sistem unik tampon lize për të lëshuar shpejt ADN-në gjenomike nga mostrat e indeve të kafshëve për reaksione PCR, kështu që është veçanërisht i përshtatshëm për testimin gjenetik në shkallë të gjerë.
Procesi i çlirimit të ADN-së gjenomike nga buferi i lizës përfundon brenda 10-30 minutash në 65°C.Nuk kërkohen procese të tjera si heqja e proteinave dhe ARN-së, dhe gjurmët e ADN-së së çliruar mund të përdoren si shabllon për reaksionin PCR.
2×PCR LehtëTMMix (UNG) përdor dUTP në vend të dTTP në bazë të 2×PCR EasyTMPërzieni dhe shton enzimën UNG (Uracil-N-glikozilazë) që mund të degradojë shabllonin që përmban dUTP në të njëjtën kohë.Përpara reaksionit PCR, enzima UNG përdoret për të degraduar produktin PCR që përmban uracil.Enzima UNG nuk do të ketë asnjë efekt në shabllonin që nuk përmban uracil, duke siguruar në këtë mënyrë specifikën dhe saktësinë e amplifikimit dhe duke parandaluar mundësinë e kontaminimit të produkteve PCR gjatë testimit gjenetik në shkallë të gjerë.
D-Taq ADN polimeraza është një ADN polimerazë e zhvilluar posaçërisht nga Foregene për reaksione të drejtpërdrejta PCR.Polimeraza e ADN-së D-Taq ka tolerancë të fortë ndaj një sërë frenuesish të reaksionit PCR dhe mund të amplifikojë në mënyrë efikase sasitë e gjurmëve të ADN-së në sisteme të ndryshme komplekse të reagimit dhe shpejtësia e amplifikimit mund të arrijë 2 Kb/min, e cila është veçanërisht e përshtatshme për reaksionin e drejtpërdrejtë PCR.
Komponentët e kompletit
| Pjesa I | Tampon AL |
| Foregene Proteaza | |
| 6× Buffer ngarkimi i ADN-së | |
| Pjesa II | 2×PCR LehtëTMPërzierje (UNG) |
Karakteristikat dhe avantazhet
■Nuk kërkon shumë kohë dhe pastrim të shtrenjtë të ADN-së
■ Kërkesa për mostër është e vogël, mund të testohen vetëm 5 mg inde shtazore.
■ Nuk kërkohet trajtim i veçantë si bluarja dhe grimcimi, dhe operacioni është i thjeshtë.
■ Sistemi i optimizuar PCR bën që PCR të ketë specifikë më të lartë dhe tolerancë më të fortë ndaj frenuesve të reaksionit PCR.
■ Sistemi PCR kundër ndotjes 2×PCR LehtëTMMix (UNG) eliminon në mënyrë efektive ndotjen e shkaktuar nga produktet PCR dhe siguron specifikën dhe saktësinë e amplifikimit.
Parametrat e kompletit
Aplikimi: një shumëllojshmëri e indeve shtazore.
ADN e lëshuar nga liza e mostrës: përdoret vetëm si shabllon PCR.
Kompleti mund të përdoret për qëllimet e mëposhtme: identifikimin e transgjenozës, gjenotipizimin e kafshëve, etj.
Rrjedha e punës
Ruajtja dhe afati i ruajtjes
Pjesa I e këtij kompleti duhet të ruhet në 2-8℃.
Reagenti Buffer AL mund të ruhet për 12 muaj në kushte të thata;mund të ruhet në 2-8℃për ruajtje më të gjatë.
Reagent Foregene Protease ka një formulë unike.Për të siguruar aktivitetin dhe stabilitetin e tij, ju lutemi ruajeni në 4℃për 12 muaj.
Reagjenti 6×Buferi i ngarkimit të ADN-së mund të ruhet në 4℃ose -20℃për një kohë të gjatë.
Pjesa II e këtij kompleti duhet të ruhet në -20℃.
Reagenti 2×PCR LehtëTMMix(UNG), nëse përdoret shpesh, mund të ruhet edhe në 4℃për ruajtje afatshkurtër (përdoret brenda 10 ditëve).
