Ne besojmë vazhdimisht se karakteri i dikujt vendos cilësinë e lartë të produkteve, detajet vendosin cilësinë e lartë të produkteve, së bashku me frymën REALISTIKE, EFIKASE DHE INOVATIVE të ekuipazhit për Dorëzimin e ri për Reagentin e Nxjerrjes së Acideve Nukleike (Serum/Plazma dhe Zgjidhje Punksioni), Rna e aksesueshme, gamë e gjerë e provave të ekstraktimit, ne pranojmë një gamë të gjerë testimi dhe cilësi të lartë, ne pranojmë një gamë të gjerë testimi dhe cilësi të shkëlqyera, partner.Ne mirëpresim perspektiva të reja dhe të mëparshme nga të gjitha sferat e jetës për të kontaktuar me ne për ndërveprimet e ardhshme të biznesit të vogël dhe arritjen e arritjeve reciproke!
Ne vazhdimisht besojmë se karakteri i dikujt vendos cilësinë e lartë të produkteve, detajet vendosin cilësinë e lartë të produkteve, së bashku me frymën REALISTE, EFIKASE DHE INOVATIVE të ekuipazhit përMetoda e reagentit të nxjerrjes së acidit nukleik të Kinës dhe rruazës magnetike, Produktet tona kanë gëzuar një reputacion të madh për cilësinë e tyre të mirë, çmimet konkurruese dhe dërgesën e shpejtë në tregun ndërkombëtar.Aktualisht, ne po presim sinqerisht të bashkëpunojmë me më shumë klientë jashtë shtetit bazuar në përfitime reciproke.
Manualet e udhëzimeve:Manuali i Udhëzimeve të Kompletit të Izolimit të ARN-së totale të bimëve Plus

Ne besojmë vazhdimisht se karakteri i dikujt vendos cilësinë e lartë të produkteve, detajet vendosin cilësinë e lartë të produkteve, së bashku me frymën REALISTIKE, EFIKASE DHE INOVATIVE të ekuipazhit për Dorëzimin e ri për Reagentin e Nxjerrjes së Acideve Nukleike (Serum/Plazma dhe Zgjidhje Punksioni), Rna e aksesueshme, gamë e gjerë e provave të ekstraktimit, ne pranojmë një gamë të gjerë testimi dhe cilësi të lartë, ne pranojmë një gamë të gjerë testimi dhe cilësi të shkëlqyera, partner.Ne mirëpresim perspektiva të reja dhe të mëparshme nga të gjitha sferat e jetës për të kontaktuar me ne për ndërveprimet e ardhshme të biznesit të vogël dhe arritjen e arritjeve reciproke!
Dorëzimi i ri përMetoda e reagentit të nxjerrjes së acidit nukleik të Kinës dhe rruazës magnetike, Produktet tona kanë gëzuar një reputacion të madh për cilësinë e tyre të mirë, çmimet konkurruese dhe dërgesën e shpejtë në tregun ndërkombëtar.Aktualisht, ne po presim sinqerisht të bashkëpunojmë me më shumë klientë jashtë shtetit bazuar në përfitime reciproke.

Kolona u mbyll

Pas mbylljes së kolonës, rendimenti i ARN-së zvogëlohet ose madje është i pamundur të pastrohet ARN, dhe masa e ARN-së e marrë është e ulët.

Analiza e shkaqeve të zakonshme:

1. Pushimet e mostrave nuk janë të plota.

Thyerja e kampionit nuk shkakton bllokimin e plotë të KOLONAVE PËR PASTRIMIN E ADN-së, duke ndikuar në rendimentin dhe cilësinë e ARN-së.Ne rekomandojmë funksionimin e shpejtë të bluarjes në një azot të lëngshëm të mjaftueshëm kur thyeni mostrat, Mundohuni të shtypni murin qelizor të mostrës, membranën qelizore dhe indet e tjera.Për mostrat bimore të polisaharideve të poliolit, ju rekomandojmë të përdorni KIT PLUS për izolimin e ARN-së totale të bimëve.

2. Kur thithet supernatanti i ndarë i mostrës me kolonën e pastrimit të ADN-së, precipitati i mundshëm i fragmentuar i qelizave mund të thithet.

Sedimentet e fragmentuara të qelizave të marra do të shkaktojnë kolonën VETËM-ARN e cila do të bllokohet kur të kryhet operacioni i adsorbimit të ARN-së (shih hapin 6).Ne ju rekomandojmë me kujdes kur thithni këtë supernatant për të shmangur thithjen e mbeturinave qelizore.

3. Sasia fillestare e mostrës është shumë.

Përdorimi i tepërt i mostrës do të rezultojë në fragmentim jo të plotë të mostrës ose lizë jo të plotë të qelizave nga Buffer PSL1, duke rezultuar në bllokimin e kolonës së pastrimit gjatë pastrimit.Kompleti i izolimit të ARN-së totale të bimëve Çdo mostër e vetme operative e pastruar është 50 mg.Për mostrat bimore të polisaharideve të poliolit, ju rekomandojmë të provoni KIT PLUS për izolimin e ARN-së totale të bimëve.

4. Temperatura e centrifugës është shumë e ulët.

I gjithë procesi i izolimit dhe pastrimit të ARN-së kryhet në temperaturën e dhomës (20-25°C), përveç se indi i mostrës është thyer nga azoti i lëngshëm. Temperatura e disa centrifugave kriogjenike është më e ulët se 20℃, e cila mund të shkaktojë bllokim të kolonës së pastrimit të ADN-së dhe/ose kolonës vetëm me ARN.Nëse kjo ndodh, vendosni temperaturën e centrifugës në 20-25℃, dhesigurohuni që përzierja e lizës dhe/ose supernatanti i shtuar me etanol të jetë ngrohur paraprakisht në 37°C.

Asnjë ARN nuk është nxjerrë ose rendimenti i ARN-së është i ulët

Zakonisht ka shumë faktorë që ndikojnë në efikasitetin e rikuperimit, si: përmbajtja e ARN-së së mostrës, mënyra e funksionimit, vëllimi i elucionit, etj.

Analiza e shkaqeve të zakonshme si më poshtë:

1. Gjatë operacionit është kryer një banjë akulli ose centrifugim në temperaturë të ulët (4°C).

Sugjerim: Punoni në temperaturën e dhomës (15-25°C) në të gjithë procesin, mos bëni banjë akulli dhe centrifugim në temperaturë të ulët.

2. ARN është degraduar për shkak të ruajtjes jo të duhur të kampionit ose ruajtjes afatgjatë të kampionit.

Rekomandim: Mostrat e sapo mbledhura duhet të ngrihen shpejt në azot të lëngshëm dhe më pas të ruhen në -80°C për një kohë të gjatë, të shmangni ngrirjen dhe shkrirjen e përsëritur të mostrave;ose njomni menjëherë mostrat në tretësirën e stabilizatorit të ARN-së RNA më vonë (mostrat e kafshëve).

3.Fragmentimi dhe liza e pamjaftueshme e mostrës çojnë në bllokimin e kolonës së pastrimit.

Sugjerim: Kur bluani indet, ju lutemi sigurohuni që indi është bluar mjaftueshëm dhe transferojeni shpejt në tampon PSL1 të përgatitur paraprakisht (konfirmoni që proporcioni i saktë i β-ME është shtuar, shihni hapin 1 të procedurës).

4.Eluenti është shtuar gabimisht.

Sugjerim: Sigurohuni që ddH2O pa RNase të hidhet në mes të membranës së kolonës së pastrimit.

5. Vëllimi i saktë i etanolit absolut nuk iu shtua Buffer PSL2 ose Buffer PRW2.

Sugjerim: Ju lutemi ndiqni udhëzimet, shtoni volumin e saktë të etanolit absolut në Buffer PSL2 dhe Buffer PRW2 dhe përzieni mirë përpara se të përdoret kompleti.

6. Sasia e mostrës së indeve është e papërshtatshme.

Sugjerim: Përdorni 50 mg ind për 500 μl Buffer PSL1.Përdorimi i shumë indeve do të zvogëlojë sasinë e ARN-së së nxjerrë dhe pastërtia e ARN-së që rezulton gjithashtu do të reduktohet.Ne rekomandojmë fuqimisht që doza fillestare e mostrës nuk duhet të kalojë 50 mg për operacion të nxjerrjes së ARN-së.

7.Vëllimi i papërshtatshëm i elucionit ose elucioni jo i plotë.

Sugjerim: Vëllimi i eluentit të kolonës së pastrimit është 50-200 μl;nëse efekti i elucionit nuk është i kënaqshëm, rekomandohet zgjatja e kohës në temperaturën e dhomës pas shtimit të ddH2O të ngrohur pa RNase, si p.sh. 5-10 min.

8. Kolona e pastrimit ka mbetje etanoli pas larjes me BufferPRW2.

Sugjerim: Nëse tubi i zbrazët centrifugohet për 1 min dhe ka mbetur ende etanol pas larjes në tampon PRW2, mund ta rrisni kohën e centrifugimit të tubit bosh në 2 min, ose ta vendosni kolonën e pastrimit në temperaturën e dhomës për 5 min për të hequr plotësisht etanolin e mbetur.

9. Kompleti është përdorur gabimisht.

Sugjerim: Për mostrat bimore të polisaharideve polifenolike, përdorimi i kompleteve të zakonshme si Kompleti i izolimit të ARN totale të bimëve mund të mos jetë në gjendje të marrë mostra ideale të ARN-së.Ne ju rekomandojmë të përdorni Plant Total RNA IsolationKit Plus, i cili është krijuar posaçërisht për mostrat e bimëve polifenolike polisakaride.Një komplet i zhvilluar posaçërisht për nxjerrjen e ARN-së nga mostrat e bimëve të polifenolit dhe polisaharidit.

Vlera OD260/OD280 është e ulët

Elucioni i ARN-së me ddH2O dhe i përdorur për leximet e spektrofotometrit rezulton në vlera të ulëta OD260/OD280.Ne rekomandojmë përdorimin e 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (në vend të ddH2O pa RNase për të elutuar ARN) për të marrë vlera relativisht të sakta OD260/OD280, shihni “Analizat e përqendrimit dhe pastrimit të ARN” në faqen 19.

ARN-ja e pastruar degradohet

Cilësia e ARN-së së pastruar lidhet me faktorë të tillë si ruajtja e mostrës, kontaminimi me RNase dhe manipulimi.

Analiza e shkaqeve të zakonshme:

1. Mostrat e indeve nuk u ruajtën në kohë pas grumbullimit.

Rekomandim: Nëse mostrat e indeve nuk përdoren në kohë pas grumbullimit, ju lutemi ruani ato në azot të lëngshëm në temperaturë të ulët menjëherë ose transferojini në -80°C për ruajtje afatgjatë pas ngrirjes së shpejtë në azot të lëngshëm, ose zhytni menjëherë kampionët në tretësirën e stabilizuesit të ARN-së RNA më vonë (mostrat e kafshëve ).Për nxjerrjen e ARN-së, përpiquni të përdorni mostrat e indeve të mbledhura fllad.

2.Ngrirja dhe shkrirja e përsëritur e mostrave të indeve.

Sugjerim: Gjatë ruajtjes së mostrave të indeve, është mirë që ato të priten në copa të vogla për t'u ruajtur dhe të hiqet një pjesë e tyre kur i përdorni për të shmangur degradimin e ARN-së të shkaktuar nga ngrirja dhe shkrirja e përsëritur e mostrave.

3.RNase futet në sallën e operacionit ose nuk përdoren doreza njëpërdorimshe, maska, etj.

Sugjerim: Eksperimentet e nxjerrjes së ARN-së kryhen më së miri në operacione të veçanta të ARN-së dhe tabela e laboratorit duhet të pastrohet përpara eksperimentit dhe gjatë eksperimentit duhet të vishen doreza dhe maska ​​njëpërdorimshme për të shmangur degradimin e ARN-së të shkaktuar nga futja e RNase në masën më të madhe.

4. Reagenti kontaminohet nga RNase gjatë përdorimit.

Sugjerim: Zëvendësoni me një seri të re komplete të nxjerrjes së ARN-së totale të bimëve për eksperimentet përkatëse.

5. Tubat e centrifugës dhe majat e pipetës që përdoren për manipulimin e ARN-së janë të kontaminuara me RNase.

Sugjerim: Sigurohuni që tubat e centrifugës, majat e pipetave, pipetat, etj. të përdorura në nxjerrjen e ARN-së janë të gjitha pa RNase.

Manualet e udhëzimeve:

Manuali i Udhëzimeve të Kompletit të Izolimit të ARN-së totale të bimëve Plus