Duke qëndruar pas perceptimit të "Krijimit të produkteve të cilësisë së lartë dhe krijimit të miqve me njerëz sot nga e gjithë bota", ne vendosim vazhdimisht dëshirën e blerësve për të filluar me "nxjerrjen totale të ARN", Ne jemi të gatshëm të bashkëpunojmë me miqtë e biznesit nga brenda dhe jashtë vendit dhe të krijojmë një të ardhme të shkëlqyer së bashku.
Duke qëndruar pas perceptimit të "Krijimit të produkteve të cilësisë së lartë dhe krijimit të miqve me njerëz sot nga e gjithë bota", ne vendosim vazhdimisht dëshirën e blerësve për të filluar meNxjerrja totale e ARN-së, Për shkak të cilësisë së mirë dhe çmimeve të arsyeshme, produktet tona janë eksportuar në më shumë se 10 vende dhe rajone.Ne mezi presim të bashkëpunojmë me të gjithë klientët nga brenda dhe jashtë vendit.Për më tepër, kënaqësia e klientit është ndjekja jonë e përjetshme.

Përshkrimet e kompleteve

50 Përgatitje, 200 Përgatitje

Ky komplet përdor kolonën e rrotullimit dhe formulën e zhvilluar nga kompania jonë, e cila mund të nxjerrë ARN totale me pastërti të lartë dhe me cilësi të lartë nga inde të ndryshme shtazore me efikasitet të lartë. Ofron një kolonë efikase të pastrimit të ADN-së, e cila mund të ndajë dhe absorbojë lehtësisht ADN-në gjenomike nga supernatanti dhe lizati i indeve, i thjeshtë dhe që kursen kohë;Kolona vetëm me ARN mund të lidhë ARN në mënyrë efikase dhe mund të përpunohet njëkohësisht me një formulë unike Shumë mostra.

I gjithë sistemi është pa RNase, në mënyrë që ARN-ja e nxjerrë të mos degradohet;Buffer RW1, Buffer RW2 sistem larjeje buferike, në mënyrë që ARN-ja e përftuar të jetë pa proteina, ADN, jone dhe ndotje organike.

Komponentët e kompletit:

Karakteristikat dhe avantazhet

■ Nuk ka nevojë të shqetësoheni për degradimin e ARN-së;i gjithë sistemi është pa RNase
■ Hiqni në mënyrë efektive kolonën e pastrimit të ADN-së që përdor ADN-në
■ Hiqni ADN-në pa shtuar DNase
■ Të gjitha veprimet e thjeshta përfundojnë në temperaturën e dhomës
■ Funksionimi i shpejtë mund të përfundojë në 30 minuta
■ I sigurt - nuk kërkohet reagent organik
■ Pastërti e lartë -OD260/280≈1.8-2.1

Aplikimi i kompletit

Është i përshtatshëm për nxjerrjen dhe pastrimin e ARN-së totale nga një shumëllojshmëri e indeve të kafshëve të freskëta ose të ngrira ose qelizave të kultivuara.

Parametrat e produktit

■ Aplikimet në rrjedhën e poshtme: sinteza e cDNA-së me vargun e parë, RT-PCR, klonimi molekular, Northern Blot, etj.
■ Mostrat: indet e kafshëve, qelizat e kultivuara
■ Dozimi: Indet 10-20mg, Qeliza(2-5)×10⁶
■ Kapaciteti maksimal i lidhjes së ADN-së të kolonës së pastrimit: 80 μg
■ Vëllimi i elucionit: 50-200 μl

Rrjedha e punës

Diagramë

Kompleti i izolimit të ARN-së totale të kafshëve i trajtuar 20 mg
Mostrat e freskëta të miut, merrni 5% ARN totale të pastruar 1% agar

Elektroforeza e glikogelit
1: Shpretka 2: Veshka
3: Mëlçia 4: Zemra

Ruajtja dhe afati i ruajtjes

Kompleti mund të ruhet për 24 muaj në temperaturën e dhomës (15–25 ℃) ose 2–8 ℃ për një kohë më të gjatë.Buffer RL1 mund të ruhet në 4 ℃ për 1 muaj pas shtimit të β-merkaptoetanolit (opsionale). Duke qëndruar pas perceptimit të "Krijimit të produkteve të cilësisë së lartë dhe krijimit të miqve me njerëz sot nga e gjithë bota", ne vazhdimisht vendosim dëshirën e blerësve për të filluar me dizajnin e rinovueshëm për Kinën Furnizuesi Isopropyl Chemicals GoodAS3-Chemic607. për të bashkëpunuar me miqtë e biznesit nga brenda dhe jashtë vendit dhe për të krijuar një të ardhme të shkëlqyer së bashku.
Dizajni i rinovueshëm për Kinën Alkooli izopropil, Furnizuesi i alkoolit izopropil, Për shkak të cilësisë së mirë dhe çmimeve të arsyeshme, produktet tona janë eksportuar në më shumë se 10 vende dhe rajone.Ne mezi presim të bashkëpunojmë me të gjithë klientët nga brenda dhe jashtë vendit.Për më tepër, kënaqësia e klientit është ndjekja jonë e përjetshme.

ARN nuk nxirret ose rendimentet e ARN janë të ulëta

Shpesh ka një sërë faktorësh që ndikojnë në efikasitetin e rikuperimit, të tilla si: përmbajtja e ARN-së e mostrës së indeve, mënyra e funksionimit, vëllimi i elucionit, etj.

1. Gjatë operimit është kryer banjë akulli ose centrifugim kriogjenik (4 °C).

Rekomandim: Punoni në temperaturën e dhomës (15-25°C) gjatë gjithë procesit, mos bëni banjë me akull dhe centrifugoni në temperatura të ulëta.

2. Ruajtja e gabuar e mostrës ose koha e tepërt e ruajtjes së mostrës.

Rekomandim: Ruani mostrat në -80 °C ose ngrini në azot të lëngshëm dhe shmangni përdorimin e përsëritur të ngrirjes-shkrirjes;përpiquni të përdorni inde të freskëta ose qeliza të kultivuara për nxjerrjen e ARN-së.

3. Liza e pamjaftueshme e kampionit.

Rekomandim: Kur homogjenizoni indin, sigurohuni që indi të jetë homogjenizuar mjaftueshëm dhe që qelizat e indeve të jenë të ndara mjaftueshëm për të shpjeguar çlirimin e ARN-së.

4. Eluenti nuk është shtuar saktë.

Rekomandim: Konfirmoni që ddH pa RNase₂O shtohet pika-pikisht në mes të membranës së kolonës së pastrimit.

5. Vëllimi i saktë i etanolit absolut nuk iu shtua Buffer RL2 ose Buffer RW2.

Rekomandim: Ndiqni udhëzimet, shtoni volumin e saktë të etanolit absolut në Buffer RL2 dhe Buffer RW2 dhe përzieni mirë përpara se të përdorni kompletin.

6. Doza e mostrës së indit nuk është e përshtatshme.

Rekomandim: Përdorni 10-20 mg inde ose (1-5) × 10⁶qelizat për 500 μl tampon RL1, pasi përdorimi i tepërt i indeve mund të rezultojë në ekstraktim të reduktuar të ARN-së.

7. Vëllimi jo i duhur i elucionit ose elucioni jo i plotë.

Rekomandim: Vëllimi i elucionit të kolonës së pastrimit është 50-200 μl;nëse efekti i elucionit nuk është i kënaqshëm, rekomandohet të zgjatet koha e vendosjes në temperaturën e dhomës pas shtimit të ddH të parangrohur pa RNase₂O, p.sh. për 5-10 min.

8. Kolona e pastrimit ka mbetje etanoli pas larjes me Buffer RW2.

Rekomandim: Nëse ka mbetje etanoli pas larjes me tampon RW2, centrifugimi me tub bosh për 1min, koha për centrifugimin e tubit bosh mund të rritet në 2min ose kolona e pastrimit mund të vendoset në temperaturën e dhomës për 5 minuta për të hequr në mënyrë adekuate etanolin e mbetur.

ARN-ja e pastruar degradohet

Cilësia e ARN-së së pastruar lidhet me faktorë të tillë si ruajtja e kampionit, ndotja me RNase dhe manipulimi, etj.

1. Mostrat e indeve nuk mbahen në kohë.

Rekomandim: Nëse mostrat e indeve ose qelizat nuk përdoren në kohën e duhur pas grumbullimit, kriokonservoni menjëherë në -80 °C ose azot të lëngët.Për të nxjerrë ARN, përdorni një mostër indi ose qelize të sapomarrur sa herë që është e mundur.

2. Ngrirja-shkrirja e përsëritur e mostrave të indeve.

Rekomandim: Kur ruani mostrat e indeve, është mirë që ato të priten në copa të vogla për t'u ruajtur dhe të hiqni njërën prej tyre kur i përdorni për të shmangur ngrirje-shkrirjen e përsëritur të mostrës dhe degradimin e ARN-së.

3. RNase është futur ose jo duke përdorur doreza, maska, etj. gjatë operacionit.

Rekomandim: Eksperimentet e nxjerrjes së ARN-së kryhen më së miri në dhoma të veçanta të manipulimit të ARN-së dhe tabela pastrohet përpara eksperimentit.

Vishni doreza dhe maska ​​të disponueshme gjatë eksperimentit për të minimizuar degradimin e ARN-së të shkaktuar nga futja e RNase.

4. Reagentët kontaminohen me RNase gjatë përdorimit.

Rekomandim: Zëvendësoni me një komplet të ri të izolimit të ARN-së totale të kafshëve për eksperimentet përkatëse.

5. Tubat e centrifugës, majat, etj. të përdorura në manipulimin e ARN-së janë të kontaminuara me RNase.

Rekomandim: Konfirmoni që tubat e centrifugës, majat, pipetat, etj. të përdorura në nxjerrjen e ARN-së janë të gjitha pa RNase.

ARN-ja e përftuar e pastruar ndikon në eksperimentet në rrjedhën e poshtme

ARN pastrohet nga kolona e pastrimit, nëse jonet e kripës, përmbajtja e proteinave është shumë e madhe do të ndikojë në eksperimentin në rrjedhën e poshtme, të tilla si: transkriptimi i kundërt,Northern Blot et al.

1. ARN e elutuar ka mbetje jonesh kripe.

Rekomandim: Konfirmoni që vëllimi i saktë i etanolit është shtuar në Buffer RW2 dhe kryeni 2 larje të kolonave të pastrimit me shpejtësinë centrifugale të treguar për funksionim;nëse ka mbetje jonesh kripe, lëreni kolonën e pastrimit në Buffer RW2 për 5 minuta në temperaturën e dhomës dhe kryeni centrifugimin për të maksimizuar heqjen e ndotjes me kripë.

2. Mbetja e etanolit në ARN të elutuar.

Rekomandim: Konfirmoni që pas larjes me tampon RW2, kryeni operacionin e centrifugimit të tubit bosh me shpejtësinë e centrifugimit të treguar për funksionim, rrisni kohën e centrifugimit të tubit të zbrazët në 2 minuta nëse ka ende mbetje etanoli, ose lëreni në temperaturën e dhomës për 5 minuta pas centrifugimit të tubit të zbrazët për të maksimizuar heqjen e centrifugimit të tubit bosh.