Kompleti i drejtpërdrejtë RT-qPCR
Përshkrimi i kompletit:
◮ Kompleti i drejtpërdrejtë RT-qPCR, duke përdorur Foreasy Reverse Transcriptase dhe Foreasy HS Taq DNA Polymerase të zhvilluara nga Foregene, me tampon reaksioni unik, e bën këtë komplet me rezistencë dhe pajtueshmëri të fortë dhe mund të testojë drejtpërdrejt reagimin duke përdorur sistemin Foregene Lysis si shabllon.Ky komplet mund të aplikohet për kompletin e zbulimit të acidit nukleik COVID-19 dhe zhvillimin e kompletit të zbulimit të acidit nukleik të baktereve të tjera patogjene.
Përshkrim
Kompleti i drejtpërdrejtë RT-qPCR ofron bufer RT-qPCR të paketuar veçmas dhe enzimë me efikasitet të lartëpërzierje (Taq, M-MLV, RI), duke e bërë atë të përshtatshëm për krijimin e kompleteve dhe sistemitrregullim, brenda verifikimit të thjeshtë.
Specifikimet
500 T, 50,000 T
Komponentët e kompletit
| Përmbajtja e kompletit (Sistemi i reagimit 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50,000 T | |
| Përzierje e drejtpërdrejtë e enzimave | 500 μL× 1 | 50 ml× 1 |
| 2× Buffer direkt RT-qPCR | 1 ml× 5 | 500 ml× 1 |
| Udhëzim | 1 | 1 |
Hapat operativ
Përpara përgatitjes së reagentit, të gjithë reagentët në komplet duhet të shkrihen në temperaturën e dhomës dhe të përzihen butësisht.
A: Përgatitni of shabllon dhe reagjent
1. Përgatitni shabllonin e përgatitur të ARN-së (Rekomandohet përdorimi i kompletit të serisë së Foregene Total RNA Isolation Kit për nxjerrjen dhe pastrimin e shabllonit të ARN-së) ose produktin për krisjen e mostrës (Rekomandohet përdorimi i sistemit Foregene Lysis), primerët specifikë (10 μM) dhe materiale të tjera harxhuese, instrument.
2. Vendosni buferin 2× Direct RT-qPCR, ddH2O pa RNase dhe Bojë Referenciale 20× ROX (nëse është'nevojiten) në kutinë me akull, duke i bërë këto të shkrihen natyrshëm dhe të përzihen butësisht.
B: Përgatitni of RT-qPCR sistemi
Tabela 1 : Përgatitni of RT-qPCR ssistemi
| Komponenti | Vëllimi | Përqendrimi përfundimtar |
| 2× Buffer direkt RT-qPCR | 10 μL | 1× |
| Përzierje e drejtpërdrejtë e enzimave | 1μL | |
| Primer përpara (10 μM) | 0.8 μL | 50-900 nM |
| Primer i kundërt (10 μM) | 0.8 μL | 50-900 nM |
| Sonda (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Shablloni (ARN ose Lizatë) | X μL | |
| Bojë referimi 20×ROX | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Vëllimi i përgjithshëm | 20μL |
C: Set të RT-qPCR reagimi program
Tabela 2 : RT-qPCR reagojnëon program vendosjen (për shembull: dy-hap metodë)
| Hapi | Temperatura | Koha | Ciklet | përmbajtja | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Transkriptimi i kundërt |
| 2 | 95 ℃ | 1 min | 1 | Para-denatyrimi | |
| 3 | 95 ℃ | 10 sek | 40-45 | Denatyrimi | |
| 60 ℃ | 30 sekonda 2* | Pjekja/Zgjatja | |||
Ruajtja dhe afati i ruajtjes
-Kit duhet të ruhet në -20± 5℃.Periudha e vlefshmërisë është 12 muaj.
-Shmangni ciklet e përsëritura të ngrirje-shkrirjes (<5 cikle).
