QuickEasyᵀᴹ Kit-Taqman PCR në kohë reale
Përshkrimet
2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman i ofruar nga QuickEasyTMKompleti në kohë reale PCR Kit-Taqman është një sistem master miks i gjeneratës së re i krijuar për reaksionin e amplifikimit të PCR në kohë reale duke përdorur sonda fluoreshente specifike.Thelbi i saj Foregene HS Taq ADN Polimeraza bazohet në modifikimin e Antitrupave, i përdorur në lidhje me sistemin PCR të optimizuar më tej Foregene, ka specifikë më të lartë dhe efikasitet amplifikimi.Krahasuar me përzierjen e zakonshme PCR, ajo ka aftësi më të fortë përforcuese dhe shkallë më të ulët të mospërputhjes.Mund të përdoret në reaksionin sasior PCR me fluoreshencë për të reduktuar amplifikimin jospecifik dhe për të përmirësuar saktësinë e PCR.Mund të përmirësojë shumë specifikën e produktit dhe ndjeshmërinë e reagimit.Në të njëjtën kohë, ROX u sigurua si një ngjyrë referimi e brendshme.
QuickEasyTMKompleti në kohë reale PCR Kit-Taqman ka një fushë të gjerë aplikimi për sasinë e shabllonit dhe mund të marrë një kurbë standarde të mirë në rajone të ndryshme sasiore dhe mund të përcaktojë me saktësi sasinë dhe zbulojë gjenet e synuara me përsëritshmëri të mirë dhe besim të lartë.
Specifikimet
200 Përgatitje,500 përgatitje,1000 përgatitje,Përgatitjet 2000
Komponentët e kompletit
QuickEasyTMKit-Taqman PCR në kohë reale(20μlsistemi) | ||||
Përmbajtja e kompletit | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 Përgatitje | 500 Përgatitje | 1000 Përgatitje | Përgatitjet 2000 | |
2×ShpejtLehtëTM PCR e vërtetë Përziejini-Takman | 1 ml×2 | 1.7 ml×3 | 1.7 ml×6 | 1.7 ml×12 |
20×Bojë referimi ROX | 200μL | 0,5 ml | 1 ml | 1 ml×2 |
ddH pa ADN2O | 1.7 ml | 1.7 ml×2 | 10 ml | 20 ml |
IFU | 1copë | 1copë | 1copë | 1copë |
Karakteristikat dhe avantazhet
■ Sistemi unik i optimizimit PCR e bën 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman më i pajtueshëm.
■ Foregene HS Taq Polymerase me startim të nxehtë ka efikasitet më të lartë të amplifikimit, ndjeshmëri më të lartë të amplifikimit dhe specifikë më të lartë amplifikimi.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman përdor një sistem unik të optimizuar nga Foregene për të përmirësuar ndjeshmërinë dhe specifikën e zbulimit të sondës specifike për sekuencën, e cila mund të përdoret për gjenotipizimin dhe përcaktimin e variacionit të numrit të kopjeve dhe për të marrë rezultate të sakta.
■ Ky produkt vjen me bojë referencë të brendshme ROX, e cila mund të përdoret për të eliminuar sfondin e sinjalit dhe gabimin e sinjalit midis puseve, gjë që është e përshtatshme për klientët për t'u përdorur në lloje të ndryshme të instrumenteve sasiore PCR.
Aplikimi i kompletit
■ PCR sasiore me fluoreshencë për analizën sasiore të modelit;
■ Camplifikimi tradicional PCR;
■ Mund të përdoret për zbulimin e alelit.
Ruajtja dhe afati i ruajtjes
Kompleti duhet të ruhet në -20°C në errësirë;nëse përdoret shpesh, mund të ruhet edhe në 4°C për një periudhë të shkurtër kohe (përdoret brenda 10 ditëve).
Parimet e projektimit të primerit PCR në kohë reale
Forward Primer dhe Reverse Primer
Për PCR në kohë reale, dizajni i primerit është shumë i rëndësishëm.Primerët lidhen me specifikën dhe efikasitetin e amplifikimit PCR dhe mund të dizajnohen duke iu referuar parimeve të mëposhtme:
Gjatësia e primerit: 18-30 bp.
Përmbajtja GC: 40-60%.
Vlera Tm: Softueri i projektimit të Primer, siç është Primer 5, mund të japë vlerën Tm të primerit.Vlerat e Tm të primerëve në rrjedhën e sipërme dhe të poshtme duhet të jenë sa më afër që të jetë e mundur.Formula e llogaritjes së Tm mund të përdoret gjithashtu: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Gjatë kryerjes së PCR, një temperaturë nën vlerën Tm të primerit prej 5 °C zgjidhet përgjithësisht si temperatura e pjekjes (rritja përkatëse në temperaturën e pjekjes mund të rrisë specifikën e reaksionit PCR).
Primerë dhe produkte PCR:
Gjatësia e produktit për amplifikimin e PCR të primerit të projektimit preferohet të jetë 100-150 bp.
Abetaret e projektimit në zonën strukturore dytësore të shabllonit duhet të shmangen sa më shumë që të jetë e mundur.
Shmangni formimin e 2 ose më shumë bazave plotësuese midis skajeve 3' të primerëve në rrjedhën e sipërme dhe të poshtme.
Baza terminale e primerit 3' nuk mund të jetë e pranishme me 3 G ose C shtesë të njëpasnjëshme.
Vetë primerët nuk mund të kenë struktura plotësuese, përndryshe do të krijohet një strukturë fije flokësh, e cila ndikon në amplifikimin e PCR.
ATCG duhet të shpërndahet sa më në mënyrë të barabartë të jetë e mundur në sekuencën e primerit dhe baza e terminalit 3′ duhet të shmanget si T.
Shtojca 1:Paketë e komponentëve të komponentëve të kompletit Cell Direct RT-qPCR
1.Zgjidhja e lizës së qelizave
| |||
Komponentët e kompletit (Sistemi i lizës 24 pusi / pus) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
PjesëI | Tampon CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Proteaza Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Tampon ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
PjesëII | Gomë ADN-je | 400 μl | 1 ml × 2 |
2. Përzierje RT
| |
Komponentët e kompletit (Sistemi i reagimit 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Përzierje e drejtpërdrejtë RT | 800 μl |
DdH pa RNase2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Komponentët e kompletit (Sistemi i reagimit 20 μl) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
Bojë referimi 50× ROX | 40 μl | 200 μl |
DdH pa RNase2O | 1.7 ml | 10 ml |